Vse o določanju krvne skupine s cikloni
Informacije o značilnostih krvi (skupina in faktor Rh) so temeljnega pomena v primerih, ko gre za življenje in smrt osebe. Taka analiza je obvezna pred kirurškim posegom, porodom in v drugih primerih, ki lahko vodijo do potrebe po takojšnjem postopku transfuzije krvi. Obstajajo različne metode in tehnike za izvajanje raziskav, ena od njih pa temelji na uporabi snovi, imenovanih cikloni. Kako določanje krvne skupine s pomočjo ciklonov in kakšne značilnosti ima postopek?
Bistvo testiranja
Cikloni so posebna protitelesa, ki se sintetizirajo iz krvi laboratorijskih miši z uporabo tehnologij genskega inženiringa.
Imajo številne prednosti pred standardnimi in bolj znanimi reagenti nekaterih zdravstvenih delavcev, zato se v sodobnih laboratorijih uporabljajo veliko pogosteje.
Bistvo metode določanja krvne skupine s pomočjo ciklonov je njihova sposobnost reagiranja z aglutinogeni (celicami, ki sestavljajo človeško kri), kar ima za posledico lepljenje ali aglutinacijo. Predstavniki vsake krvne skupine imajo določeno vrsto aglutinogenov: manjkajo iz nosilcev prve skupine (A), lastniki druge skupine imajo celice tipa A itd.
Reagenti, potrebni za analizo, so prav tako razdeljeni na več sort s posebnimi značilnostmi. Da bi določili krvno skupino s cikloni, se zmešajo s vzorci človeške krvi, nato pa ocenijo reakcijo in pripravijo ustrezne sklepe.
Pravila
Da bi bila metoda določanja krvne skupine s pomočjo ciklonov čim bolj informativna, je pomembno upoštevati pravila za delo s snovmi in izvajanje postopka:
- analiza se izvede samo v popolnoma razvitem laboratoriju v sterilnih pogojih pri temperaturi od +15 do +25 stopinj in z dovolj močno svetlobo;
- pri delu je treba uporabljati samo snovi z neizteklim rokom uporabnosti (2 leti), ki so bile shranjene v tesno zaprtih posodah; če je raztopina motna, vsebuje oborino ali druge nečistoče, jo je priporočljivo nadomestiti;
- za študijo bo potrebna ravna površina (plošča, posebna plošča) bele barve, več pipet in steklene palice za mešanje vzorcev.
Postopek in metodologija
Postopek določanja krvne skupine s cikloni ima specifičen algoritem, ki je predstavljen z naslednjimi koraki:
- Nosite masko in rokavice, ogrejte vzorce krvi na 36 stopinj, cikloni - do 20 stopinj.
- Označite tableto ali ploščo za analizo in na njej napišite podatke o bolniku.
- Pod ustrezno oznako nanesite eno veliko kapljico raztopin anti-A in anti-B (približno 0,1 ml), poleg kapljice krvi (približno 0,01 ml).
- Zmešajte vzorce z reagenti skozi palice, za vsako od njih pa je bolje uporabiti ločeno orodje.
- Počakajte 3-5 minut, nežno pretresite tableto, da se tekočine dobro premešajo. Ni priporočljivo čakati več kot 10 minut, saj se bodo vzorci začeli izsuševati, zaradi česar bodo rezultati lahko popačeni.
Če je prisotna aglutinacija, se v vzorcih krvi oblikujejo majhne rdeče kosmiči in v odsotnosti reakcije lepljenja se tekočine preprosto premešajo. Za pojasnitev rezultatov uporabimo tretjo vrsto reagenta, anti-AB, ki se zmeša s krvjo, kot je opisano zgoraj. Obstajajo 4 variante reakcije ciklonov in vzorcev krvi, na podlagi katerih je mogoče določiti pripadnost krvi določeni skupini:
Anna Ponyaeva. Diplomirala je na Medicinski akademiji v Nižnem Novgorodu (2007-2014) in v rezidenčnem oddelku za klinično laboratorijsko diagnostiko (2014-2016).
- aglutinacijska reakcija je odsotna v vseh primerih (z anti-A in anti-B reagenti) - to pomeni, da je prva krvna skupina pri ljudeh;
- aglutinacija z anti-A in anti-AB snovmi označuje drugo skupino;
- prisotnost reakcije lepljenja z anti-B in anti-AB kaže, da kri pripada tretji skupini;
- če je prišlo do aglutinacije z vsemi cikloni (anti-A, anti-B, anti-AB), je skupina definirana kot četrta.
Pri določanju 4. skupine je potrebno zagotoviti, da bolnik nima nobenih bolezni, pri katerih pride do aglutinacije, ko pride kri v stik s kemičnimi snovmi.
Videoposnetek o tej temi
Dešifriranje
Za določitev krvne skupine ciklonov, ki temelji na rezultatih kemijskih reakcij, se lahko uporabi posebej izdelana tabela.
Določanje krvne skupine in Rh faktorja
Opredelitev krvne skupine in faktorja Rh sta razdeljena na dva načina:
- primarno določanje krvne skupine in Rh faktorja (anti-A, Anti-B in Anti-D)
- sekundarna diagnoza krvne skupine in faktorja Rh (standardni serum in navzkrižna metoda, določanje fenotipa, tj. C, c, E, e, C w, K, k antigeni)
Ekspresna diagnostika (primarna določitev krvne skupine in Rh faktor) ne upošteva Kellovih antigenov, da ne omenjamo drugih sistemov preverjanja. Zato se cikloni uporabljajo samo za primarno določanje krvne skupine in faktorja Rh ter v primeru nujnih indikacij transfuzije komponent krvi.
Več informacij o najredkejši krvni skupini na svetu najdete tukaj.
Določanje krvne skupine in faktorja Rh z anti-A, anti-B in Anti-D polikloni v skladu s sistemom AB0 in sistemom Rhesus
Določanje krvne skupine in Rh faktorja s anti-A, anti-B in Anti-D super-cikloni je najsodobnejša in razmeroma preprosta metoda. Za določanje krvne skupine se uporabljajo cikloni monoklonska protitelesa.
Kaj je potrebno za določitev krvne skupine in faktorja Rh?
- anti-A koliklon;
- anti-B koliklon;
- anti-D koliklon;
- raztopina natrijevega klorida 0,9%; Posebna tableta; sterilne palice.
Algoritem in vrstni red določanja krvne skupine
Uporabite anti-A, anti-B, ciklone na posebno tableto v eni veliki kapljici (0,1 ml), pod ustreznimi napisi.
Poleg njih spustite testno kri (0,01–0,03 ml) v eni majhni kapljici. Mešajte in opazujte začetek ali odsotnost aglutinacijske reakcije 3 minute. Če je rezultat vprašljiv, dodamo 1 kapljico 0,9% raztopine soli.
Dešifriranje rezultatov krvne skupine
- če je prišlo do aglutinacijske reakcije s ciklonom anti-A, potem kri, ki jo je treba testirati, spada v skupino A (II);
- če je prišlo do aglutinacijske reakcije s ciklonom anti-B, potem kri, ki jo je treba testirati, spada v skupino B (III);
- če se pri anti-A in anti-B poliklonih ni pojavil aglutinacijski test, potem preskusna kri spada v skupino 0 (I);
- če je prišlo do aglutinacijske reakcije s anti-A in anti-B polikloni, potem testna kri pripada skupini AB (IV), kot je prikazano na sliki.
Določanje Rh faktorja z anti-D ziklononom
Na tableti zmešajte veliko kapljico (0,1 ml) anti-D ciklona in majhno kapljico (0,01 ml) pacientove testne krvi. Začetek reakcije aglutinacije ali njegova odsotnost se spremlja 3 minute.
- če je prišlo do aglutinacijske reakcije s ciklonom anti-D, potem je kri, ki jo je treba testirati, Rh-pozitivna (Rh +)
- če se pri ciklonu anti-D ni pojavil aglutinacijski test, potem kri, ki jo je treba testirati, pripada Rh-negativnemu (Rh -)
Z drugimi besedami, pri mešanju anti-D z Rh pozitivnimi rdečimi krvnimi celicami pride do aglutinacijske reakcije, in če je kri Rh negativna - ni aglutinacije (kot je prikazano na sliki - četrta krvna skupina je Rh negativna).
Določanje krvnih skupin s standardnimi serumi
Krvno razvrščanje s standardnimi izohemaglutinirnimi serumi - iskanje in odkrivanje antigenov A in B v krvi s pomočjo aglutinacijske reakcije. Za doseganje cilja:
- Standardni izohemaglutinirajoči serumi krvnih skupin O (I) so brezbarvni, A (II) modra, B (III) rdeča, AB (IV) rumena.
- Bele plošče, označene s krvnimi skupinami: 0 (I), A (II), B (III), AB (IV).
- NaCl 0,9%
- Steklene palice
Metoda določanja standardnih serumov krvne skupine
Metoda določanja standardnih serumov krvne skupine
- Podpišite tablico (polno ime bolnika);
- Uporabimo oznake dveh serij standardnih serumov krvnih skupin I, II in III v volumnu 0,1 ml, tako da od leve proti desni oblikujemo dve vrsti treh kapljic: 0 (I), A (II), B (III);
- Vzemite kri iz vene. Prenesite šest kapljic pacientove testne krvi s stekleno palčko na ploščo s šestimi točkami poleg kapljice standardnega seruma in premešajte.
Aglutinacija se začne v 30 sekundah. V kapljicah, kjer je prišlo do aglutinacije, dodamo po 0,9% NaCl po eno kapljico in ocenimo rezultat.
Vrednotenje rezultatov določanja standardnih serumov krvnih skupin
Pozitivna reakcija aglutinacije je lahko peščena ali luskasta. V primeru negativne reakcije ostane kapljica enakomerno rdeča. Rezultati reakcij v kapljicah s serumi iste skupine (dve seriji) se morajo ujemati. Povezanost testne krvi z ustrezno skupino se določi s prisotnostjo ali odsotnostjo aglutinacije z reakcijo z ustreznimi serumi po opazovanju 5 minut. Treba je opozoriti, da če so serumi vseh treh skupin dali pozitivno reakcijo, to kaže, da testna kri vsebuje oba aglutinogena (A in B) in spada v skupino AB (IV). Vendar pa je v takih primerih za izključitev nespecifične aglutinacijske reakcije potrebno izvesti dodatno kontrolno študijo preskusne krvi s standardnim izohemaglutinirnim serumom skupine AB (IV), ki ne vsebuje aglutininov. Le odsotnost aglutinacije v tej kapljici, v prisotnosti aglutinacije v kapljicah, ki vsebujejo standardne serume skupin 0 (I), A (II) in B (III), omogoča upoštevanje specifične reakcije in dodajanje testne krvi skupini AB (IV).
Določanje krvne skupine po navzkrižni metodi
Navzkrižno povezovanje krvi je odkrivanje prisotnosti ali odsotnosti antigenov A in B v krvi, ki se testira, s standardnimi izohemaglutinirajočimi serumi in α in β protitelesi z uporabo standardnih rdečih krvnih celic. Reakcijo s standardnimi serumi izvedemo, kot je opisano zgoraj.
Metoda določanja križne metode kri
Reakcija s standardnimi rdečimi krvnimi celicami
Za reakcijo s standardnimi eritrociti so potrebni standardni eritrociti treh krvnih skupin: 0 (I), A (II), B (III).
Metode izvajanja reakcije s standardnimi rdečimi krvnimi celicami
- Krv za pregled vzamemo iz vene v epruveto, centrifugiramo ali pustimo 30 minut, da dobimo serum.
- Na označeno ploščo nanesemo tri velike kapljice (0,1 ml) krvnega seruma iz epruvete, poleg njih pa še eno majhno kapljico (0,01 ml) standardnih rdečih krvnih celic skupin.
- Ustrezne kapljice pomešamo s steklenimi palicami, ploščo stresamo, opazujemo 5 minut, dodamo 0,9% NaCl kapljicam z aglutinacijo in rezultat ocenimo.
Ocena rezultatov reakcije s standardnimi rdečimi krvnimi celicami
Ovrednotite rezultate, pridobljene s standardnimi serumi izohemaglutinirajočih in standardnih rdečih krvnih celic. Posebnost rezultatov reakcije s standardnimi eritrociti - eritrociti iz skupine 0 (I) veljajo kot kontrole. Rezultat navzkrižne metode je zanesljiv, če pri reakciji s standardnimi izohemaglutinirajočimi serumi in s standardnimi eritrociti, odgovori o skupini preiskovane krvi sovpadajo. Če se to ne zgodi, je treba obe reakciji ponoviti.
Algoritem za določanje krvne skupine po ciklonih
Stoletja so znanstveniki poskušali čim bolj spoznati človeško telo in se naučiti, kako zdraviti bolne od katere koli bolezni. Eden od pomembnih parametrov je določanje krvne skupine s strani ciklonov. Medicina dodeljuje pri ljudeh le štiri krvne skupine, ne glede na spol ali raso. Imunološke značilnosti, ki tvorijo glavno razliko v skupini antigenov eritrocitov, so podedovane.
Kaj je ciklon?
Razvrščanje krvi po različnih laboratorijskih reagentih je standardna raziskovalna metoda. Informacije za krvno skupino so izjemno pomembne, zlasti v primerih, ko oseba potrebuje nujno pomoč. Pred operacijo je treba določiti vrsto posameznih antigenskih značilnosti osebe. Enak postopek je obvezen za vojaško osebje (informacije so navedene na uniformi), za ženske pred porodom itd.
Določanje krvnih skupin s kolikoni je relativno nova metoda raziskovanja. Ta analiza se lahko izvede na kateri koli stopnji bolnišničnega zdravljenja bolnikov.
Za izvedbo laboratorijskih raziskav ne potrebujemo veliko časa, dovolj je, da imamo vse potrebne kemikalije (poliklone) in preprosto opremo.
Polikloni so v bistvu ena od vrst imunoglobulinov (vrsta M). To so monoklonska protitelesa, ki so bila gensko spremenjena. Poliklone smo dobili kot rezultat serumske izpostavljenosti sterilnim laboratorijskim mišem. Nastane kopičenje tekočine v trebuhu glodalca, ki vsebuje ta protitelesa.
Priprava postopka
Določanje krvnih skupin s pomočjo ciklonov zahteva predhodno pripravo in delovanje po ustaljenem algoritmu. Razmere v prostoru, v katerem se opravi analiza, so navedene posebej. Temperatura zraka ne sme biti nižja od 15 in ne višja od 25 stopinj, sicer se rezultat študije ne more šteti za zanesljivega. Prostor ne sme biti prah, živali, žuželke in drugi dejavniki, ki lahko fizično vplivajo na postopek študije. Tudi izvajanje laboratorijske analize zahteva dobro osvetlitev prostora.
Pri uporabi ciklonov je pomembno, da so viale tesno pokrite in da se reagenti ne izsušijo, sicer se sposobnost protiteles proti aktivnemu delovanju izrazito zmanjša. Pred postopkom pripravimo vse potrebne zaloge. Analiza bo zahtevala biološko cev za vzorčenje, reagentsko ploščo, sterilne pipete in palice za interakcijo z biološkimi vzorci.
Če laboratorijski tehnik ne opravlja le laboratorijskih preiskav, temveč tudi vzorčenje krvi, je potrebno pripraviti brizge za enkratno uporabo ali vakuumske cevi, žico, medicinski alkohol, bombažne kroglice in sterilne serviete. Prav tako je na voljo orodje za označevanje pacientovih bioformacij.
Analiza
V sodobni laboratorijski diagnostiki se za določitev krvne skupine in Rh faktorja uporabljajo tri vrste standardnih ciklonov. Reagent anti-A je obarvan rdeče, steklenica, pokrovček ali etiketa steklenice pa je obarvan. " Vrsta »Anti-B« je obarvana modro in »Anti-AB« ni označena z barvnim označevalnikom. Proizvajalci reagentov proizvajajo embalažo s 5 ali 10 ml ciklonov. Uporaba pokvarjenih ali slabo kakovostnih reagentov ni dovoljena.
Ob prisotnosti vidnih napak v embalaži ali pojava kosmičev v tekočini se ciklon ne uporablja.
- Za določitev vrste krvi na posebej pripravljeni plošči, ki je okrašena kot miza, postavite ciklone različnih vrst (A, B in AB). Vsak mora biti podpisan. Reagent se nanese na posebej označeno območje. Vsako vrsto poliklona je treba nanesti z ločeno sterilno pipeto.
- Poleg reagentov se položi na kapljico pacientove krvi.
- Sterilni palični reagenti so pomešani z biološkim vzorcem.
- Že po nekaj sekundah opazite spremembe in reakcijo aglutinacije v teku. V skladu s pravili opazovanja je treba opraviti v 3 minutah. Potem lahko zaključite rezultate študije.
Kako razumeti rezultat
- Odsotnost kakršne koli reakcije lepljenja v vseh vzorcih pomeni, da v bolniških celicah eritrocitov ni testnega tipa aglutinogena. Vzorec krvi je razvrščen v skupino I (tip 0).
- Če bolnikova eritrocitna celica reagira z reagenti anti-a in anti-AB, potem ima bolnik krvno skupino II (tip A).
- Opazna aglutinacija vzorca krvi, ki se testira s kolikoni tipa „Anti-AV“ in „Anti-B“, pomeni, da ima bolnik krvno skupino III (tip B).
- Če je bolnikova kri vstopila v reakcijo z vsemi kemičnimi reagenti, potem preskusni vzorec spada v skupino IV (tip AB). Pri določanju krvne skupine s pomočjo ciklonov ni potrebno dodatno testiranje, saj reagenti ne vsebujejo aditivov, ki bi lahko sprožili spontano reakcijo.
Določanje krvne skupine in Rh faktorja se izvaja v laboratorijskih ustanovah v zdravstvenih ustanovah. To je dokaj preprosta študija, ki zagotavlja zelo koristne in pomembne informacije o osebi.
V prihodnje vam bodo informacije o krvni skupini in faktorju Rh omogočile hitro pomoč in organizacijo transfuzij krvi po poškodbi ali nesreči ter reševanje življenj. Svojo številko GK lahko ugotovite tako, da naročite lastno raziskavo v katerem koli medicinskem laboratoriju. Prejeti podatki so potrebni za vnos v kartico bolnika.
Algoritem za določanje krvne skupine (Rh) s cikloni in kako to narediti z uporabo tabele
Določanje ciklonskih krvnih skupin se izvaja nosečnicam pred porodom, bolnim osebam pred operacijo in ko so lahko potrebne transfuzije krvi. Obstajajo tudi druge metode, ki uporabljajo različne snovi, vendar je ta metoda najbolj natančna in se najpogosteje uporablja.
Kaj je ciklon?
Za določanje krvne skupine so cikloni protitelesa, proizvedena s posebno tehnologijo. Za pridobitev ciklonov uporabite laboratorijske testne podgane. Glodalce se injicira s posebnim sredstvom, nato pa se iz peritoneja odvzame kri, vključuje pa snovi, ki so potrebne za analizo.
Polikloni v svoji sestavi pripadajo imunoglobulinom, reagirajo z antigeni na membrani eritrocitov. Vrste teh snovi se uporabljajo za identifikacijo skupin. Med analizo reagirajo različne vrste ciklonov z aglutinogeni, kar omogoča identifikacijo skupine in Rh faktorja posameznika.
Zdravilo se proizvaja v tekoči obliki v steklenicah po 5 in 10 ml. Vsaka vrsta zdravila ima svoje značilnosti.
Od ciklona se odlikuje prednost pred drugimi serumi, saj ne zahtevajo dolge priprave na raziskavo in omogočajo hitro izvedbo. Niso človeške celice, zato zdravniki ne bodo mogli ujeti nobene okužbe, ko pridejo v stik z njimi.
Priprava postopka
Urad mora biti brez prahu, muh, insektov, ki lahko motijo preskus. Prostor mora biti dobro osvetljen. Steklenica s kolonijo mora biti tesno zaprta, tako da reagenti niso suhi, sicer se bo zanesljivost analize zmanjšala. Za določitev krvne skupine in rezusov s pomočjo ciklonov je potrebno posebno usposabljanje. V laboratorijskem prostoru je lahko temperatura zraka + 15... + 25 ° C, v tem primeru bo rezultat pravilen.
Pred analizo pripravite potrebne medicinske instrumente:
- epruveta;
- tableta, na katero se nanaša reagent;
- pipete;
- palice za odstranjevanje laboratorijskih vzorcev.
Če zdravstveni delavec ne opravlja samo raziskav, ampak tudi opravi analizo od pacienta, morate pripraviti:
- vleka;
- alkohol za zdravljenje;
- brizga za enkratno uporabo;
- epruvete;
- bombažna palčka;
- serviete;
- poseben laboratorijski marker.
Kako poteka študija?
Algoritem za določanje krvne skupine s cikloni je naslednji. Laboratorijsko testiranje se opravi z uporabo treh vrst teh snovi: t
- »Anti-A« je rdeča, steklenica, pokrov in etiketa pripravka imajo enak odtenek.
- "Anti-B" ima modro barvo, pokrov, steklenico in etiketo, pobarvano v modri barvi.
- "Anti-D" je brezbarven in je v prozorni steklenici.
Pri določanju faktorja Rh s cikloni se ne smejo uporabljati neustrezni reagenti. Če je viala poškodovana ali je v njej sediment, bo reagent izgubil svoj učinek. Za določitev skupine zdravnik uporabi ciklone na laboratorijski plošči v obliki tabele. Uporabljajo se različni tipi reagentov (A, B in D). Vsak vzorec je podpisan. Coliclon se nanaša na označeno območje. Vsaka vrsta reagenta se vzame s pipeto.
Poleg seruma kaplja 1 kapljica človeške krvi, nato pa se z reagenti premeša čista palica. Po nekaj sekundah se bo reakcija začela. Laboratorij spremlja reagente 3 minute. Potem lahko dešifrirate rezultat analize.
Rezultati dekodiranja
Določanje krvne skupine s pomočjo ciklona se pojavi pri dešifriranju rezultatov analiz. Če v vzorcu ni reakcije lepljenja, to pomeni, da v analizi ni aglutinogena te vrste. V tem primeru se analiza nanaša na skupino 1. Če celice reagirajo z reagenti „Anti-A“ in „Anti-D“, ima oseba tip 2 (A).
Interakcija eritrocitov s tsiklononom tipa "Anti-B" in "Anti-D" kaže, da ima oseba 3 skupino (tip B). Če teleta sodelujejo z vsemi vrstami ciklonov, ima bolnik 4 krvne skupine (tip D). Če se s pomočjo teh reagentov odkrije krvna skupina, ni treba opraviti dodatnega preverjanja, ker Cikloni nimajo dodatkov, ki bi povzročili napačno reakcijo. Krvno skupino določimo v zdravstveni ustanovi, analizo opravimo v posebnem laboratoriju.
Tabela razlage rezultatov študije: t
Ta test vam omogoča, da ugotovite pomembne podatke o skupini in pacientovem Rh faktorju. Rezultati vam omogočajo, da bolniku po operaciji zagotovite zdravstveno oskrbo in transfuzijo krvi. Če želite izvedeti svojo skupino, lahko opravite analizo v laboratoriju katere koli zdravstvene ustanove. Podatki se vnesejo v pacientov vprašalnik in pridobljeni podatki se v kliniki shranjujejo več let.
Kaj so cikloni? Kako z njihovo pomočjo določiti krvno skupino in Rh faktor
Kolikloni so monoklonska protitelesa, ki so bila pridobljena iz krvi miši z genskim inženiringom in se uporabljajo za določanje krvne skupine sistema ABO in faktorja Rh.
Poliklone, za razliko od standardnih serumov, odlikuje visoka aktivnost in avidnost (čas nastopa, kot tudi resnost vezave (reakcija aglutinacije).
Osnovni polikloni:
Faktor RH in krvne skupine določata kolonija.
Tehnika zaznavanja skupine z uporabo kolonije
Določanje s to metodo se izvaja v laboratorijskih pogojih. Temperatura zraka naj bo med +15 - + 25 stopinj Celzija. Študijo je treba opraviti z dovolj dobro osvetlitvijo.
Reagenti morajo biti tesno zaprti, saj se aktivnost protiteles po sušenju bistveno zmanjša. Ne uporabljajte kosmičev in motnih reagentov. Vsak reagent zahteva ločeno pipeto.
Analiza se izvede na beli plošči ali tableti z dobro omočeno površino. Zaradi visoke aktivnosti in avidnosti ciklonov obstaja možnost uporabe serije anti-A in anti-B reagentov.
Na tableti morate narediti napise z imeni antigenov anti-A / anti-B. Nadalje, približno 0,1 mililitra ciklonov kaplja iz ustreznih napisov spodaj. Anti-A je rumenkasto rožnate barve, anti-B pa modro.
Določanje krvnih skupin
Blizu monoklonskih protiteles kaplja ena kapljica krvi, pomešana z vogalom steklene ploščice ali steklene palice z reagenti. Temeljito sperite in posušite steklo ali palico pred nadaljnjim mešanjem.
Opazovanje procesa aglutinacije poteka 2,5 minute, medtem ko je treba ploščo ali tableto rahlo stresati. Po času ocenite rezultat. Opozoriti je treba, da opazovanja aglutinacije ne zahtevajo nobenih posebnih naprav.
Aglutinati so jasno vidni tudi s prostim očesom, hitro se združijo in tvorijo velike kosmiče. Če se lepljenje ne pojavi, kapljica reagenta dobi enakomerno rdečo barvo.
Rezultati dekodiranja
Tabela primerjave krvnih skupin in zoliklon vam omogoča razumevanje rezultatov.
- Če ni aglutinacije (z anti-A in anti-B), eritrociti ne vsebujejo antigenov A in B. To je krvna skupina I;
- Če pride do aglutinacije samo z anti-A, rdeče krvne celice vsebujejo le antigen A, ki označuje krvno skupino II;
- Če aglutinacija poteka samo z anti-B, rdeče celice vsebujejo antigen B, ki je značilen za skupino III;
- Če opazimo aglutinacijo z zoliklonammi anti-A in anti-B, rdeče krvne celice vsebujejo oba antigena. Za izključitev avtoaglutinacije je treba izvesti kontrolni postopek: v tem primeru se zmeša 0,1 ml izotonične raztopine natrijevega klorida in 0,01 ml preskusne krvi. Če je aglutinacijska reakcija odsotna, se določi IV skupina.
Določanje Rh
Za določitev Rh faktorja se na ploščo nanese velika kapljica anti-D juhe in v njej se nahaja majhna kapljica (manj kot desetkrat) pregledane krvi. Mešajte in ovrednotite rezultat. Če se začne aglutinacijska reakcija, ta tehnika določa, da je kri pozitivna za Rh, če je Rh faktor negativen - ni aglutinacije.
Tsoliklonov drog
Razlikuje se anti-D Erythrotest-tsolyklon.
Obstajajo tri vrste:
- Normalno anti-D-tiklon. Ko se doda, se razvije indirektna aglutinacijska reakcija;
- Super. Povzroča neposredno aglutinacijo;
- Anti-D-mix pripravek, ki vsebuje sestavine običajnega in super-anti-D ciklona). Z njihovo pomočjo lahko identificirate krvno skupino in določite pripadnost krvi Rh.
Razlika med ostalimi raztopinami je v imenu, saj protitelesa, ki jih vsebujejo - imunoglobulini M in G - omogočajo le tipizacijo krvi za antigene AB0. Razlika je izključno v mehanizmu adhezije rdečih krvnih celic (neposredna / posredna aglutinacija).
Vsako od teh zdravil ima svoje posebnosti uporabe in roka uporabnosti. Vendar pa so v laboratorijski klinični diagnozi najbolj priljubljena le zgoraj navedena tri zdravila (anti-A, anti-B, anti-D).
Kako določiti skupino v primeru napačne interpretacije rezultatov analize
Včasih je mogoče dobiti lažne, napačne rezultate. Na primer, če se, če se doda v krvni proizvod, njihova barva spremeni ali če se opazijo aglutinacija v vseh celicah plošče.
Da bi preprečili takšne rezultate, če je izvedena definicija skupine s koliklonami, algoritem ukrepov predvideva določena pravila. Najprej si oglejte obdobje kroženja ciklonov. Nesprejemljivo je uporabljati reagente, ki so potekli.
Upoštevajte vse pogoje za pravilen postopek. Prostor mora imeti dobro opremljeno delovno mesto s temperaturnimi pogoji in zadostno osvetlitvijo. Če navodilo za pripravo vsebuje navodila in zahtevano vlažnost, je treba upoštevati ta faktor.
Zelo pomembna je čistost tablete, saj lahko kontaminacija povzroči napake v študiji in posledično tudi nepravilne rezultate.
Kje lahko opravim analizo?
Opredelitev skupine ciklonov se postopoma povečuje. Če je bil prej ta postopek izveden izključno v specializiranih bolnišnicah (na primer samo v oddelkih za hematologijo in kirurgijo), je sedaj postopek na voljo v skoraj vsakem dovolj opremljenem laboratoriju.
Tehnika ciklonov se uporablja v klinikah. V njem so vključene različne metode za hitro določanje krvne skupine, ki se izvaja z namenom, da se pacientu takoj postavi diagnoza.
Številne kozmetične centre in zasebna medicina ponujajo to storitev tudi na plačani osnovi. Ta postopek, kot je navedeno zgoraj, se izvaja brezplačno v smeri terapevta ali zdravnika.
Če na kliniki ni priložnosti za opravljanje krvne preiskave, se lahko študija izvede samostojno, če obstaja komplet zdravil in posebna tableta. Vendar je treba opozoriti, da je za doseganje zanesljivih rezultatov treba upoštevati pogoje postopka, zlasti glede sterilnosti.
B. Določanje krvne skupine s pomočjo kolonij (monoklonska protitelesa)
Uporabljamo standardne nize monoklonskih protiteles z visoko specifičnostjo, ki vsebujejo anti-A, anti-B in anti-AB reagente. Za vsako določitev krvne skupine je dovolj, da uporabimo eno vrsto reagentov (polikloni) anti-A in anti-B.
Na označeno ploščo kapljajo v tri točke, preučevane rdeče krvne celice (0,02 ml). Ob njih, pod ustreznimi napisi, postavite anti-A, anti-B in anti-AB ciklone v eno kapljico (0,1 ml) v razmerju 1: 5. 1: 6. Po mešanju reagentov in krvi s steklenimi paličicami (z vogali steklenih stekel) se plošča občasno pretrese, potek reakcije opazimo 3 minute.
Vrednotenje rezultata se izvede s prisotnostjo aglutinacije eritrocitov z ustreznim reagentom.
Obstajajo štiri možnosti za določanje rezultatov:
a) Aglutinacija v vseh treh kapljicah ciklonov - to pomeni, da proučevane rdeče krvne celice vsebujejo antigene (A in B) in kri pripada skupini AB (IV). Da bi izključili panaglutinacijo, ki jo je mogoče opaziti pri posameznih bolnikih (multipli mielom, opeklina), kot tudi v popkovnični krvi novorojenčkov, je treba pri ugotavljanju krvne skupine AB (IV) izvesti kontrolno študijo: ena kapljica (0,1 ml) izotonične raztopine Natrijev klorid se zmeša z majhno kapljico (0,01 ml) preskusne krvi. Aglutinacijski test mora biti odsoten.
b) Aglutinacija s anti-A in anti-AB cikloni - to pomeni, da proučevane rdeče krvne celice vsebujejo le antigen A in kri spada v skupino A (II).
c) Aglutinacija s anti-B in anti-AB cikloni - to pomeni, da proučevane rdeče krvne celice vsebujejo le antigen B in kri spada v skupino B (III).
d) Aglutinacija ni prisotna pri vseh treh kapljicah tsiklonona - to pomeni, da proučevane rdeče krvne celice ne vsebujejo antigenov A in B, kri spada v skupino 0 (I).
Vrednotenje rezultatov določanja krvnih skupin z uporabo ciklonov je podano v tabeli:
Določanje krvne skupine s cikloni
✓ Dokument potrdi zdravnik
Opredelitev krvne skupine in faktorja Rh ima ključno vlogo v primerih, ko gre za reševanje človekovega življenja. Zato se takšna študija izvede pri vseh bolnikih v predoperativnem obdobju, pri nosečnicah pred porodom in v mnogih drugih primerih, ki lahko zahtevajo nujno transfuzijo. Obstaja več načinov za določanje krvne skupine z uporabo različnih laboratorijskih reagentov, ena od njih pa temelji na uporabi kemikalij, imenovanih polikloni. Kakšna je določitev krvne skupine za ciklone in kako poteka postopek?
Določanje krvne skupine s cikloni
Za kaj je analiza?
Skupina in faktor Rh sta genetsko določena značilnost krvi, ki je podedovana od staršev in ostane nespremenjena skozi življenje posameznika. Razvrstitev krvnih skupin poteka na podlagi specifičnega biokemičnega parametra in sestave antigenov ter ima 4 glavne skupine. Transfuzija krvi nezdružljive skupine ali drugega dejavnika Rh bolniku nosi smrtno nevarnost - imunski sistem začne proizvajati protitelesa proti tujim celicam, ki jih napadajo in uničujejo. Zato je v situacijah, ki prinašajo tveganje za veliko izgubo krvi, potrebno natančno določiti krvni in Rh faktor tako za darovalca kot za prejemnika.
Preglednica krvnih skupin in faktorjev Rh
Kaj so cikloni?
Cikloni so protitelesa, ki se pridobivajo s tehnologijami genskega inženiringa. Običajno se laboratorijske miši vzamejo za pridobivanje ciklonov - v žival se injicira poseben pripravek, po katerem se tekočina odvzame iz trebušne votline - to pomeni, da vsebuje snovi, potrebne za analizo. Z znanstvenega vidika se ciklokloni lahko pripišejo imunoglobulinom M, ki lahko reagirajo s celicami, specifičnimi za aglutinogene, ki so prisotne na površini rdečih krvnih celic.
Aglutinogeni oziroma njihovi tipi so podlaga za razvrstitev krvnih skupin: na primer, prva skupina prevoznikov nima teh snovi, druga ima aglutinogene tipa A itd. Med postopkom se nekateri cikloni odzovejo z različnimi vrstami. aglutinogenov, kar nam omogoča, da določimo bolnikovo krvno skupino.
Krvna skupina in Rh faktor - fotografija
Cikloni se proizvajajo v obliki tekočine, ki se vlije v steklenice po 5 ml ali 10 ml, pri čemer ima vsaka vrsta posebne lastnosti:
- anti-A je rdečkasta tekočina;
- anti-B ima modro barvo;
- anti-AB (anti-D) je brezbarvna prosojna raztopina.
Prednost ciklonov pred drugimi kemičnimi reagenti je, da ne potrebujejo posebne priprave za analizo in vam omogočajo, da jo izvedete čim prej. Poleg tega niso celice človeškega telesa, zato je okužba medicinskega osebja ob stiku s snovmi popolnoma izključena.
Določanje krvnih skupin po sistemu AB0 z uporabo anti-A in Anti-B ciklonov
Kako potekajo raziskave?
Ravna, ravna površina (tableta), navlažena z vodo, niz kemičnih reagentov in vzorec biološke tekočine je potrebna za določitev krvne skupine z uporabo ciklonov, strokovnjak pa lahko uporabi katero koli kri: kapilarno, vensko, zamrznjeno itd.
- Strani tablete so označene tako, da ne zamenjujejo, kateri od njih bo uporabljen eden ali drug ciklon.
Postopek določanja krvne skupine s kolikoni
Tabela krvne skupine
Pomembno je! Po nekaj minutah bo prišlo do reakcije, po kateri je mogoče z veliko natančnostjo ugotoviti, da kri pripada določeni skupini.
Razlaga rezultatov
Interpretacija rezultatov postopka se opravi vizualno - tekočine se bodisi popolnoma združijo, bodisi pride do lepljenja (aglutinacije) krvnih celic, zaradi česar se v njem oblikujejo biomateriali in nastajajo majhne kosmiči.
Dešifriranje je naslednje:
- če reakcija ni prisotna v vseh vzorcih biomateriala, se lahko dodeli skupini I (to pomeni, da v krvnih celicah ni aglutinogena);
- reakcija krvnih celic s ciklonom anti-A kaže, da kri testne osebe spada v skupino II;
- adhezija eritrocitov s anti-B ciklonom je znak krvne skupine III;
- če je biomaterial reagiral z vsemi snovmi, potem spada v skupino IV.
Preiskovana krvna skupina O (I)
Za preverjanje točnosti rezultatov in določitev Rh faktorja se v vzorce biomaterialov doda ciklon AB - če je prišlo do aglutinacijske reakcije, se določi v krvi kot pozitivna (odsotnost lepljenja eritrocitov kaže na negativen Rh faktor). Za izključitev bolezni, pri katerih pride do aglutinacije ob stiku s kakršnimi koli dražilnimi snovmi, se kapljica pacientove krvi zmeša s slanico. V primerih, ko rezultatov ni mogoče vizualno določiti, se analiza ponovi in vzorci se pregledajo pod mikroskopom.
Tabela Reakcije različnih krvnih skupin s anti-A in anti-B cikloni.
Coliclon Anti-B Dropper Bottle
Kaj je treba upoštevati med analizo?
Da bi bili rezultati analize čim bolj zanesljivi, je treba med postopkom upoštevati več pogojev:
- reagenti morajo biti shranjeni v hladnem prostoru pri temperaturi + 2-8 stopinj v steklenicah s tesno zvitim pokrovom (v primeru kršitve pravil skladiščenja, hitro izgubijo svoje lastnosti);
- Za analizo ni dovoljeno uporabljati izteklih poliklonov (to je približno 30 dni) ali tekočin, ki vsebujejo usedline, kosmiče ali naplavine;
- študija se izvaja v dobro osvetljenem prostoru pri temperaturi zraka, ki ni nižja od +15 in ne višja od +25 stopinj, in ne sme biti umazanije, prahu in drugih dejavnikov, ki bi lahko izkrivili rezultat;
Med postopkom mora biti temperatura zraka
Postopek razvrščanja krvi
Reakcijski čas mora biti vsaj 3 minute in če je rezultat vprašljiv, je treba čas opazovanja za vzorce biomaterialov podaljšati na 5 minut. Vendar pa se bo po 10 minutah biomaterial izsušil in naravne rdeče krvne celice se bodo oborile, zato ne smete zaupati tej študiji.
Kaj lahko vpliva na rezultat?
Cikloni so občutljivi na okoljske dejavnike oziroma pri izvajanju študije je treba upoštevati temperaturne pogoje in higienska pravila - prostor mora biti čist in suh, posamezni vzorci krvi pa ne smejo biti v stiku. Poleg tega lahko človeška kri pri nekaterih patologijah spremeni svoje značilnosti, zaradi česar je raziskava veliko bolj zapletena. Tako pri bolnikih z motnjami v delovanju jeter, vranice, septičnih procesov in obsežnih opeklin pri bolnikih opazimo tako imenovano krvno panaglutinacijo - eritrociti se celo ob reakciji s solno raztopino oborijo. Pri bolnikih z levkemijo in novorojenčkom so opazili drugačno sliko - krvne celice se ne odzivajo na dražljaje, zaradi česar ni mogoče slediti reakciji lepljenja.
Kaj vpliva na rezultate postopka
Bodite pozorni! Poleg tega dvojčici, osebe s presajenim kostnim mozgom ali tisti, ki so bili podvrženi večkratnim transfuzijam krvi, pri bioloških tekočinah obstajajo različne vrste rdečih krvnih celic - med analizo so opazili nepredvidljive rezultate. Za določitev skupine v zgornjih primerih so potrebne dodatne laboratorijske preiskave s posebno opremo.
Analiza s cikloni je eden najpreprostejših in najbolj natančnih načinov za določanje krvne skupine osebe. Če so upoštevana vsa pravila in pogoji postopka, je verjetnost napačnega rezultata zmanjšana, zato se kemijski reagenti te vrste uporabljajo v skoraj vseh sodobnih laboratorijih.
Video - Določanje krvnih skupin s cikloni
Ta članek je všeč?
Shrani, da ne izgubiš!
Srednje specializirana medicinska izobrazba
LAGODICH Leonty G., kirurg
DOLOČITEV KRVNE SKUPINE S STRANI
O tehniki manipulacije
"Določanje uporabe krvne skupine. T
monoklonska protitelesa (po koloniji) "
2-79 01 01 „Zdravstveno podjetje“,
2-79 01 31 "Zdravstvena nega"
Krvna skupina z
monoklonska protitelesa (po koloniji)
Indikacije: potreba po transfuziji krvi, priprava na operacijo.
1) anti-A, B, D SUPER;
2) test krvi;
3) označena tableta;
4) steklena stekelca (steklene palice);
5) pipeta za zbiranje krvi;
8) regulirano razkužilo.
Napredek:
1. Preverite primernost ciklonov, krvi darovalca.
2. Nanesite masko, očala, predpasnik, rokavi, rokavice, obdelajte zadnjo 70% raztopino alkohola ali 3% raztopino kloramina, steklenico segrejte s krvjo do 36 ° C, topila ciklonov - do 20 ° C.
3. Pišite na krožniku F. I. O. darovalca in prejemnika.
4. Odprite ampule s tsiklononi, topila, zmešajte vse z ločenimi brizgami, nalijte tsiklonon v viale s pipeto (anti-A - rdeča, anti-B - modra).
5. Pridobite kri prejemnika in darovalca.
6. V dveh vodnjakih ene serije uporabimo 1 kapljico (0,05 ml) poliklona: v prvem - anti-A coliklon, v drugem - anti-B poliklon.
7. Vzemite kapljico krvi (0,005 ml) 10-krat manj kot kapljico ciklona iz steklene ploščice v vodnjak in jo zmešajte s kapljico ciklona na homogeno mesto z ločenim koncem steklene palice ali z ločeno pipeto za vsako vdolbinico.
8. Krožnik se nežno vrti 2,5 minute.
9. Ocenite rezultat vzorca brez dodajanja izotonične raztopine natrijevega klorida.
10. Krožnik, palice, pipete, brizge, igle se razkužijo v 3% raztopini kloramina 1 uro.
1. Če ni aglutinacije z dvema ciklonoma, je prva krvna skupina 0 (I).
2. V prisotnosti aglutinacije s ciklonom anti-A je krvna skupina A (II) druga.
3. V prisotnosti aglutinacije s anti-B ciklonom je krvna skupina B (III) tretja.
4. V prisotnosti aglutinacije z dvema ciklonoma je AB (IV) krvna skupina četrta, ki jo je treba potrditi z aglutinacijo s ciklonom anti-AB in odsotnostjo nespecifične aglutinacije z izotonično raztopino natrijevega klorida.
1. Odredba Ministrstva za zdravje Republike Belorusije z dne 21. junija 2006. № 509 "O standardizaciji učne tehnologije za izvajanje terapevtskih manipulacij v ustanovah, ki zagotavljajo srednje specializirano medicinsko izobraževanje."
2. I.R. Gritsuk, I.K. Vankovich, “Nursing Surgery” - Minsk: Višja šola, 2000.
3. Yarovich, I.V. Oprema za nego in ravnanje - Minsk: Višja šola, 2006.
Metoda kolonije. Algoritem za. Rezultati dekodiranja.
Cikloni so monoklonska protitelesa, pridobljena z genskim inženiringom iz krvi sterilnih miši in uporabljena za določanje krvne skupine sistema ABO.
Za razliko od standardnih serumov so za ciklone značilne zelo visoka aktivnost in avidnost, to je čas nastopa in resnost aglutinacijske reakcije (lepljenje). Glavni cikloni so: anti-A, anti-B, anti-AB, anti-0 in drugi. Določajo krvno skupino in faktor Rh.
Bistvo je, da so cikloni protitelesa in protitelesa reagirajo na antigene, rdeče krvne celice imajo antigene, kjer je aglutinacija, potem je ustrezen antigen.
Na tableti naredite napise: anti-A in anti-B. Pod ustreznimi napisi kaplja približno 0,1 ml ciklonov. Reagent Anti-A je rumenkasto rožnate barve, anti-B je modre barve. Poleg monoklonskih protiteles kaplja krvi kaplja in se zmeša z reagenti s stekleno palčko ali steklenim kotom. Pred mešanjem naslednjih par kapljic se palica ali steklo temeljito opere in obriše.
Določanje krvne skupine s cikloni
Metoda analize
Algoritem za določanje krvne skupine AB0 in faktorja Rh s cikloni olajšuje in standardizira postopek tipkanja. Omogoča vam nedvoumno razlago rezultata reakcije antigena / protitelesa. Za vsako študijo sistema AB0 zadostuje ena serija reagentov. Predmet raziskave je polna kri, masa eritrocitov, oprane eritrocite, krvne celice v serumu ali fiziološki raztopini. Na primer, tukaj je shema za izvajanje tipizacije človeške krvi z uporabo antigena AB0.
- Zagotavljajo svetlo sobno osvetlitev in temperaturo zraka med 15 in 25 ° C.
- Označite jašče tablet: Anti-A, Anti-B, Anti-AB.
- Dodajte eno kapljico (približno 0,1 ml) anti-A, Anti-B, Anti-AB reagentov na podpisane vdolbine.
- Vsaj majhno kapljico koncentriranega medija, ki vsebuje eritrocite (0,01–0,03 ml), dodajte ob veliki kapljici vsakega reagenta.
- V vsaki od treh vdolbinic ločite monoklonski reagent s krvjo z ločeno sterilno stekleno palico.
- Tableto narahlo zavrtite 2,5 - 3 minute. Aglutinacija se običajno tvori v 5 do 10 sekundah. Čas je potreben za odkrivanje šibkejših antigenov.
- Izvedite vizualno oceno rezultatov reakcije v vsaki vdolbinici. Rezultat reakcije kaže na odkrivanje ustreznega aglutinogena.
Rezultati reakcije
Tabela rezultatov določanja krvne skupine s pomočjo ciklonov