Encimsko vezan imunski test (ELISA)
Encimsko vezan imunski test (ELISA) - sodobna laboratorijska študija, pri kateri se izvaja iskanje specifičnih protiteles v krvi ali antigenih do določenih bolezni, da bi ugotovili ne le etiologijo, temveč tudi stopnjo bolezni. Rezultati ELISA se lahko poda kvalitativno in kvantitativno.
Trenutno se ELISA uporablja v naslednjih primerih:
1) iskanje specifičnih protiteles proti kateri koli nalezljivi bolezni;
2) iskanje antigenov vseh bolezni (kužnih, spolnih);
3) preučevanje hormonskega statusa bolnika;
4) pregled tumorskih markerjev;
5) pregled avtoimunskih bolezni.
Prednosti metode ELISA:
1) Visoka specifičnost in občutljivost metode ELISA (več kot 90%).
2) Sposobnost določanja bolezni in spremljanja dinamike procesa, to je primerjanje števila protiteles v različnih časovnih intervalih.
3) Razpoložljivost ELISA diagnostike v kateri koli zdravstveni ustanovi.
Relativna pomanjkljivost:
1) Identifikacija imunskega odziva (protiteles), ne pa tudi samega patogena.
Osnovni pojmi
Preden pojasnimo bistvo metode ELISA, naj na kratko preučimo nekatere koncepte.
Protitelesa (ali imunoglobulini - Ig) - specifične beljakovine, ki jih proizvaja B -
limfociti (imunske celice) kot odgovor na zaužitje infekcijskega patogena (virusi, bakterije, glive itd.). Izolirajo se imunoglobulini A (IgA), imunoglobulini E (IgE), imunoglobulini M (IgM), imunoglobulini G (IgG), imunoglobulini D (IgD). Razlikujejo se med seboj po molekularni obliki in masi, razpolovnem času, udeležbi / nesodelovanju v infekcijskih procesih, obdobjih odkrivanja od trenutka okužbe. Če upoštevamo molekulsko maso, je to predvsem v IgM - to je pentamer (950.000 daltonov), za razliko od drugih Ig (od 150 do 200.000 Da), zaradi česar IgM preprosto ne more iti skozi placentno pregrado. Zato je odkrivanje IgM pri otroku, starem 1 letu, vedno znak okužbe pri plodu. V serumu je večina imunoglobulinov predstavljena z IgG (75-85%), najmanjši pa z IgE (0,003%). V infekcijskem procesu so vpleteni le IgA, M, G. IgE je znak alergijskih reakcij in bolezni, IgD pa je mogoče najti le v tkivih bezgavk in tonzil, igra vlogo pri nastanku lokalne imunosti.
Antigeni so visokomolekularne snovi organskega izvora, zlasti patogeni infekcijskih in drugih bolezni, ter snovi različnih spremenjenih celic, ki nastanejo med določeno boleznijo (avtoimunske bolezni, onkologija).
Imunski kompleks je kompleks antigen-protitelo, ki sodeluje pri imunskem procesu.
Kaj je osnova metode ELISA?
Obstaja več vrst testov ELISA (neposredni, posredni, blokirni, konkurenčni), v praksi pa se najpogosteje uporablja heterogeni imunski test v trdni fazi ali ELISA (encimsko vezan imunski test).
Osnova encimskega imunskega testa je imunski odziv antigena in protitelesa, da tvorita imunski kompleks: antigen-protitelo, ki povzroči spremembo encimske aktivnosti specifičnih oznak na površini protiteles.
Bistvo metode ELISA
Preprosto povedano, ta proces lahko razdelimo na več stopenj:
1) Na površini vodnjakov tablete zdravnika, ki opravlja pregled, je očiščen antigen določenega patogena. Ko bolniku dodamo biološki material (krvni serum), pride do specifične reakcije med tem antigenom in želenim protitelesom (imunoglobulinom). Ta spojina bo v naslednjem koraku delovala kot »posebni antigen«.
2) V tej fazi nastajanje IR (imunskih kompleksov) - reakcija med "posebnim antigenom" in konjugatom (to je imunoglobulin, označen z encimom peroksidazo). Doda se poseben kromogen. Rezultat te encimske reakcije je tvorba obarvane snovi v vdolbini tablete, katere intenzivnost barve je odvisna od količine imunoglobulinov (protiteles), ki jih vsebuje bolnikov material.
3) Nato se rezultat ovrednoti: fotometrija z uporabo večkanalnega spektrofotometra, primerjava optične gostote preučevanega materiala z optično gostoto kontrolnih vzorcev, matematična obdelava rezultatov. Količina protiteles v pacientu je neposredno odvisna od višine optične gostote v vrtini.
Običajno se v praksi uporabljajo plošče s 96 vdolbinicami.
Pri merjenju optične gostote (OD) preskusne tekočine se izračuna količina (ali koncentracija) protiteles v enoti specifične prostornine. Nato se rezultat primerja s kontrolnim vzorcem.
Ne smemo pozabiti: za vsak testni sistem se razvijejo individualni kazalniki za beleženje rezultatov, kazalnikov norme in patologije (to je "referenčne vrednosti"). To je treba upoštevati pri ocenjevanju rezultatov vsake posamezne študije. Ni pravilno razlagati rezultatov enega laboratorija glede na „referenčne vrednosti“ drugega laboratorija. Prav tako je napačno primerjati rezultate med različnimi laboratoriji.
Pri oblikovanju reakcij ELISA je pomemben pojem avidnosti protiteles.
Avidnost protiteles je moč združitve protitelesa z antigenom in količino antigena, ki je povezan z imunoglobulini (protitelesi). Avidnost je pomembna pri ocenjevanju pričakovanega trajanja okužbe, kar je izredno pomembno pri diagnosticiranju primarne okužbe pri nosečnicah.
Osnova testa avidnosti protiteles je zdravljenje imunskega kompleksa (antigen-protitelo) z raztopino sečnine, da se uniči protein. Visoko navdušene povezave ostanejo nedotaknjene, medtem ko se nizkotrpne obveznice uničijo. Rezultat je podan kot indeks avidnosti, izražen v odstotkih (%).
Katere bolezni odkrivamo z diagnostiko ELISA?
1. Nalezljive bolezni
1.1 Virusni hepatitis A (IgM, G), B antigeni -HBsAg, HBeAg, protitelesa - IgM HBcorAg, Ig HBcorAg, IgG HBeAg), C (protitelesa Ig M, G HCV), D (IgM, G), E (Ig) M, G) in drugi.
1.2 Okužba z virusom HIV (IgG)
1.3 Okužba s citomegalovirusom (protitelesa IgM, G)
1,4 Epstein-Barrova okužba ali mononkleoza (protitelesa IgM, G do EA, VCA, NA proteini virusa)
1.5 Herpetične okužbe (protitelesa IgM, G)
1.6 Toksoplazmoza (protitelesa IgM, G)
1,7 rdečica (IgM, G)
1.8 ošpice (IgM, G), bruceloza (IgM, G), pseudotuberkuloza (IgM, G), salmoneloza (IgM, G), šigeloza ali dizenterija (IgM, G), aspergiloza (IgM, G), klopni encefalitis, borelioza in veliko drugih.
1.9 Parazitoza (Giardiasis, toxocarosis, trichinosis, opisthorchosis, echinococcosis, alveococcosis in drugi), pri katerih se odkrije IgG t
1.10 SPO (spolno prenosljive bolezni) - mikoplazmoza (IgM, G), ureaplazmoza (IgM, G), klamidija (IgA, M, G), sifilis (IgG)
1.11 Okužba s Helicobacter pylori (IgG)
2. Označevalci avtoimunskih bolezni in indikatorji človeške imunosti (skupni IgE, skupni IgG, skupni IgA, skupni IgM, skupni IgD, sekrecijski IgA, IgG 2, IgG4, CIC-krožeči imunski kompleksi, IgA in IgG na gliadin in drugi)
3. Onkološki označevalci (TNF - faktor tumorske nekroze, CEA - rak-embrionalni antigen, PSA - prostata-specifični antigen, CG - horionski gonadotropin, CA 125, alveomucin in mnogi drugi)
4. Motnje razmnoževanja (estradiol, progesteron, prolaktin, testosteron, AFP-alfafetoprotein, FSH - folikle stimulirajoči hormon in drugi)
5. Bolezni ščitnice (prosti in vezani T3, T4, tiroglobulin, tiroperoksidaza - TPO, ščitnični hormon - TSH).
Ta seznam je daleč od vseh bolezni, ki so diagnosticirane z encimskim imunskim testom.
Gradivo za analizo ELISA in pravila njegove ograje
Najpogostejši material za reakcijo ELISA je bolnikov serum, vzet na prazen želodec. Material lahko služi tudi kot spinalna tekočina, amnijska tekočina, steklaste vsebine, sluz cervikalnega kanala in sečnice, madeži.
Priprava bolnikov za dostavo materiala za test ELISA
Kri se vzame na prazen želodec. Pred dajanjem krvi ne jemljite nobenih zdravil. Posebno zdravljenje (antibakterijsko, protivirusno, antiparazitno itd.) Je treba ustaviti najmanj dva tedna pred študijo.
Pogoji proizvodnje IFA
ELISA analiza materiala poteka hitro, čez dan. Zakasnitve so lahko v različnih laboratorijih zaradi kopičenja določene količine serumov.
Možni rezultati diagnostike ELISA
Pri ocenjevanju rezultatov za specifične okužbe je pomemben razred odkritih protiteles in njihovo število. Od tega je odvisno ne le vprašanje etiologije okužbe (ali je tam ali ne), ampak tudi ocenjeno stopnjo bolezni (akutna, kronična), pa tudi prisotnost aktivne okužbe (akutno ali akutno poslabšanje kronične) v času pregleda.
Kateri so približni datumi nastanka protiteles (imunoglobulinov - Ig)?
Najzgodnejša protitelesa so IgM. Po 1-3 tednih po morebitni okužbi jih lahko prepoznate, kar je značilno za akutno fazo infekcijskega procesa. Druga situacija je pojav protiteles IgM - aktivacija (ali poslabšanje) kroničnega procesa. IgM protitelesa krožijo v povprečju približno 3 mesece, nato pa njihovo število postopoma izgine. Vendar pa je pri nekaterih bolnikih mogoče zaznati sledove IgM v 1–2 letih od trenutka okužbe.
Sodobni testni sistemi imajo visoko občutljivost, zaradi česar se pojavijo nespecifični lažno pozitivni rezultati (pogosto pri nosečnicah). Zato je treba v tej skupini bolnikov ponovno preveriti pozitivni IgM!
Protitelesa IgA se pojavijo 2–4 tedne po okužbi, vendar v zadostni količini za odkrivanje - v enem mesecu. Serumski IgA sintetizirajo plazemske celice vranice, bezgavk in sluznic, sekretorni IgA se koncentrirajo na sluznice, da opravijo svojo zaščitno funkcijo - sodelujejo pri lokalni imunosti.
Od 4. tedna po okužbi se začnejo pojavljati protitelesa IgG. Pri večini okužb se njihov titer postopoma povečuje z maksimumom v različnih časih (v povprečju 1,5-2 meseca), nato pa titer ostane na nizki ravni in kaže na imunost. Pri nekaterih boleznih (mikoplazmoza, klamidija, trihomonijaza) raven IgG ni visoka, znatno se zmanjša zaradi pomanjkanja imunosti pri teh okužbah.
Variante za odkrivanje protiteles različnih razredov: t
- Izolirana detekcija protiteles IgM kaže na prisotnost primarnega
okužbe.
- Istočasno odkrivanje IgM in IgG v krvi je značilno za primarno okužbo.
v zadnjih 2-3 mesecih, pa tudi poslabšanje kronične bolezni. Zato v nosečnosti prisotnost IgM ni vedno znak primarne okužbe.
- Samo odkrivanje IgG lahko kaže na imunost na bolezen, t
in kronične okužbe. V drugem primeru sta pomembna tako količina protiteles (titer) kot tudi sprememba tega titra v daljšem časovnem obdobju. Študije se običajno izvajajo v 2-4-6 tednih.
- Zaznavanje samega IgA ali z IgM kaže na primarno okužbo. S
pojav IgA z IgG kaže na aktivacijo kronične okužbe (v povprečju 2 tedna od časa poslabšanja).
Določanje avidnosti protiteles IgG je odličen dopolnilni korak pri diagnozi primarne okužbe pri dolgotrajni okužbi, ki ima klinični pomen, zlasti pri ocenjevanju tveganja za intrauterino okužbo ploda. Zaznavanje nizko-avidnega IgG kaže na primarno okužbo in se v povprečju odkrije 4-6 mesecev po okužbi, redkeje dlje. Nizek avid IgG zahteva druge laboratorijske dokaze o primarni okužbi (IgM). Zelo navdušena protitelesa so bodisi znak kronične bolezni in njeno poslabšanje ali uveljavljena imunost.
Značilnosti pri dojenčkih: pri otrocih do enega leta, včasih pa tudi 1,5 leta, matični IgG krožijo v krvi do različnih okužb (tj. Prodrli so skozi placento od matere do ploda med fetalnim razvojem). To samo po sebi ni znak okužbe v sedanjosti. Če se v tej starosti odkrije IgM (spomnite se, da materinski IgM ne more prestopiti posteljice), je to znak intrauterine okužbe ali okužbe, pridobljene po rojstvu.
Kvantitativna metoda ELISA
Rezultat diagnostike ELISA (z analizatorjem encimskega imunskega odziva) je podan v nekaterih enotah:
- Optična gostota (OD) vzorca je koncentracija specifičnih protiteles na volumsko enoto. Višja kot je OD vzorca, višja je koncentracija protiteles. Nekateri rezultati kažejo pozitivni koeficient (KP) - to je tudi optična gostota vzorca.
- Enote koncentracije protiteles (nanogram / mililiter ali ng / ml).
- V obliki serumskih titrov: 1:20, 1:40, 1: 100, 1: 200, 1: 400, 1: 800, 1: 1200 in tako naprej. Diagnostični titri (za katere se postavlja diagnoza bolezni in ne dejstvo okužbe) so različni za različne bolezni.
- V obliki simbolov - “+”, “-”, “?” (+, ++, +++, ++++).
- V obliki kvalitativne ocene glede na dano merilo (pozitivno ali negativno).
Pravilno je, da ocenimo število protiteles, različico razreda detekcije imunoglobulinov, zato lahko le zdravnik določi stopnjo bolezni in potrebo po zdravljenju.
Ne smemo pozabiti, da so za vsak preskusni sistem razvite lastne »referenčne vrednosti« (standardne variante), nad katerimi se diagnosticira določena bolezen (patološke različice). Za različne preskusne sisteme so „referenčne vrednosti“ različne.
Pravilna primerjava rezultatov ELISA, opravljenih v dinamiki, je možna le v primeru njihove proizvodnje v istem laboratoriju.
Analiza ELISA: prednosti in slabosti metode
ELISA analiza - kaj je to? Polno ime te diagnostične metode je encimski imunski preskus in temelji na določanju v periferni krvi protiteles različnih razredov ali imunoglobulinov, ki jih proizvaja človeško telo.
V praksi zdravnika IFA je analiza zelo pomembna, kadar je potrebno diagnosticirati katero koli nalezljivo patologijo. Ta analiza kaže ne le prisotnost nalezljive bolezni, ampak tudi stopnjo patološkega procesa. Tudi metoda ELISA ni namenjena le vzročnemu povzročitelju, temveč se uporablja za diagnosticiranje alergijskih stanj. Ta test vam omogoča, da ugotovite težave v imunskem sistemu, s številnimi boleznimi hematopoetskega sistema, avtoimunskimi in drugimi motnjami.
Zakaj potrebujem ELISA?
Vsi raziskovalci so nagnjeni k prepričanju, da je ime "protitelesa" izbrano preveč slabo. Še vedno pa odraža eno pomembno značilnost imunoglobulinov: sposobni so vezati in nevtralizirati škodljive snovi in se jim približujejo kot "ključ" za "ključavnico". Količina protiteles v krvi ne odraža le splošne sposobnosti telesa za zaščito pred okužbami, temveč tudi sposobnost oblikovanja cirkulirajočih imunskih kompleksov, ki se lahko pojavijo pri različnih avtoimunskih boleznih, na primer pri revmatoidnem artritisu ali Bechterewovi bolezni.
Kompleksi protiteles z antigenom (škodljivim faktorjem nalezljive narave) so posledica odziva organizma na uvedbo „tujcev“. Zato se imunski sistem nauči prepoznati, s pomočjo limfocitov, uči imunokompetentne celice in so sposobne proizvajati zelo specifična protitelesa. Tako so protitelesa proti Epsteinovemu virusu razporejena drugače kot protitelesa proti virusnemu hepatitisu C ali E. coli in anti-HAV ali protitelesa proti virusu hepatitisa A - drugače kot avtoantitijela na hrustančno tkivo. Visoka specifičnost in skladnost imunoglobulinov z infekcioznim patogenom daje visoko vrednost za tako laboratorijsko raziskavo kot encimski imunski preskus.
Po močni vezavi protiteles in antigenov v en sam kompleks (antigen-protitelo), škodljivi dejavniki izgubijo sposobnost poškodovanja telesnih tkiv, potem pa so ti kompleksi nevtralizirani ali lizirani s fagocitozo nevtrofilcev in "prebavljeni" zapustijo telo.
Preizkus krvi ELISA lahko pokaže, kakšen specifičen patogeni dejavnik se srečuje naše telo, na kateri stopnji telo medsebojno deluje z okužbo. Po končanem študiju lahko zdravnik z visoko stopnjo zaupanja napove predikcijo, predpiše določene vrste zdravljenja in v nekaterih primerih celo določi bolnikovo pričakovano življenjsko dobo, zlasti pri kroničnih virusnih okužbah, na primer virusnem hepatitisu C.
V nekaterih primerih pa v telesu ni nobenih infekcijskih povzročiteljev in protitelesa »ne uspejo« napasti lastnih organov in tkiv, ker so imunokompetentne celice prejele napačne informacije. Takšne bolezni se imenujejo avtoimunske, ELISA pomaga tudi pri prepoznavanju te kronične patologije in pomaga pri diagnozi.
Več o imunoglobulinih
Celotno človeško telo proizvaja 5 znanih razredov protiteles, ki so označeni z Ig (ki pomeni imunoglobuline) in spadajo v razrede A, M, G, E in D. Vsi so zelo pomembni pri interpretaciji rezultatov ELISA analize. Seveda je veliko več kompleksov in vsi niso še vedno odprti. Toda pri diagnozi različnih bolezni so najbolj dragocene prve tri vrste protiteles. Krvni test za ELISA uporablja največ informacij: čas, ko se protitelesa pojavijo v krvi, sprememba njihove koncentracije glede na čas, obdobje izginotja in vrsta specifičnih protiteles.
Tako so udeleženci primarnega, akutnega infekcijskega procesa imunoglobulini razreda M, ki vedno kažejo akutno fazo, celo v primeru, ko je bolezen klinično izbrisana. Tipičen primer je anikterična oblika akutnega virusnega hepatitisa B ali C. Preizkus ELISA za hepatitis bo pokazal, da ima oseba akutni hepatitis, simptomi, kot so bolečine v hipohondru, suha usta, boleči sklepi in drugi nespecifični simptomi, postanejo razumljivi.
Nekaj tednov kasneje so ta protitelesa v vse bolj izginjajoči koncentraciji, ki izvirajo iz imunoglobulinov razreda G. V krvi jih zaznavajo mesece, celo leta in kažejo na okrevanje, potem pa lahko ostanejo do konca življenja in tvorijo trajno imuniteto. To kaže na močno obrambo pred patogeni antigeni. Torej so protitelesa tega razreda tista, ki povzroči, da je oseba imuna na ponavljajoče se primere antraksa in kuge. Vendar obstajajo primeri, ko ta protitelesa ne vplivajo na prisotnost antigenov njihovih škodljivih učinkov. V tem primeru lahko govorimo o povečanju aktivnosti kroničnega procesa.
Kot pri IgE ima aplikacijo pri diagnosticiranju različnih parazitskih invazij in alergijskih stanj, IgD pa ima pomožno funkcijo: metoda encimske imunske metode omogoča uporabo v kompleksni diagnostiki bronhialne astme in avtoimunskih bolezni. Seveda je dekodiranje testa ELISA veliko bolj zapleteno in imunologi lahko povejo veliko več. Za katere indikacije lahko pacient sam opravi raziskavo v laboratorij?
Indikacije za analizo
Najprej morate razumeti, da take analize ni - »samo kri za ELISA«. Obstaja analiza hepatitisa, včasih - o ureaplazmi ali sifilisu. Tako je možno darovati kri za ELISA samo z namenom, da bi "naročili" iskanje želene infekcije. Samo tako nerazumljivo je, zakaj dajati kri iz žile, ne da bi vedeli, kaj iskati. Zato je metoda encimske imunske preiskave močno orodje, ki je pomembno pri diagnostičnem iskanju. Samo zdravnik lahko predpiše to analizo, ker namerno išče okužbo, za katero so značilni ti simptomi. Navadna oseba seveda lahko z ELISA naroči 150 krvnih preiskav za "vse okužbe", vendar bi bil to razumen in drag pristop k diagnozi, ki bi opravil teste za vse.
Najbolj priljubljen je namen teh testov za naslednje bolezni in stanja: t
Različne mikrobne in virusne okužbe, simptomi nalezljivih bolezni - izpuščaj, zvišana telesna temperatura, zlatenica, otekle bezgavke, sindrom driske, sum na spolno prenosljive bolezni.
Pomaga pri ELISA pri določanju ureaplazme in mikoplazme, sifilisa in klamidije, okužbe s tuberkulozo in citomegalovirusom, herpesa, virusnega hepatitisa in Epstein-Barr virusa. Trenutno lahko s pomočjo encimske imunske metode preverimo približno 500 različnih okužb;
Če sumite na napad črvov in na prisotnost simptomov, kot so alergije, eozinofilija v krvi, srbenje, dispepsija in izguba telesne mase;
Če ugotovite alergene, ki povzročajo angioedem, koprivnico, težko dihanje in astmatične napade astme.
V tem primeru so zaznali specifični Ig E, obstajajo celo alergopani, ki bodo pomagali natančno določiti alergen - lignje ali kozice, suho ribjo hrano, ki vsebuje dafnije, in hišni prah. S pollinozo vam ta metoda omogoča, da najdete točno travo, grm ali drevo, ki povzroča kihanje in solzenje spomladi;
- Ta metoda je prikazana v primerih suma na avtoimunske bolezni, ki jih zdravijo revmatologi;
- Pri sumu na rast in aktivnost tumorja;
- V kompleksni diagnozi stanja imunske pomanjkljivosti in okužbe s HIV;
- Za krvne bolezni in presaditve, za celovito oceno imunosti, na primer pred presaditvijo jeter ali ledvic.
Zdaj vemo, zakaj moramo darovati kri za test ELISA. Ugotovite, kako poteka ta raziskava.
Kako se opravlja analiza?
Klasičen material je pacientova venska kri. Če pa je potrebno, lahko raziščete najrazličnejše tekočine in tkiva: sluz, sline, izločki materničnega vratu, cerebrospinalno tekočino, steklasto telo, vsebino popkovine in plodovnice. Pomembno je vedeti, da jemanje različnih zdravil, prekomerna telesna dejavnost, zloraba alkohola lahko močno izkrivljajo rezultate testov.
Obstaja več metod, ki omogočajo to analizo. Najpogosteje v kliničnih laboratorijih s fotometrično metodo. V tem primeru se uporabljajo snovi, označene z barvo, po katerih se reakcija in označevanje kompleksa antigen-protitelo spremeni. Posledično se spremeni tudi optična gostota raztopine, ki je neposredno sorazmerna s koncentracijo odkritih protiteles. Laboratorijski spektrofotometri se uspešno uporabljajo za merjenje teh odstopanj.
Tudi za ELISA je uporabljena fluorometrična metoda, ki temelji na fluorescenci. Tudi tu se izračuna intenzivnost fluorescenčnih snovi, ki se odlagajo na vzorcih, ki se preučujejo.
Končno, v imunološki analizi z uporabo elektrokemijskih metod za določanje aktivnosti encimov, ki so specifične oznake za antigene in protitelesa. Metoda encimske imunske metode najpogosteje vključuje uporabo takih encimov, kot so alkalna fosfataza, hrenova peroksidaza in galaktozidaza. Ti encimi se lahko vežejo na protitelesa ali antigene in jih označijo zaradi svoje aktivnosti.
Proti metodi in njenim prednostim
Očitne prednosti se lahko pripišejo demokratičnim stroškom analize, možnosti njegove uporabe v širokih populacijah, na primer pri pregledovanju nosečnic za virus HIV. Metoda imunskega testa je precej specifična in se lahko uporablja za nadzor kakovosti zdravljenja številnih bolezni. Pomembno je, da je analiza pripravljena hitro in je za bolnika preprosta in varna.
Vendar pa obstajajo številne »pasti«. Torej, če imunoglobulini niso identificirani, to ne pomeni 100% odsotnosti bolezni. Dejansko, v ozadju imunske pomanjkljivosti, telo preprosto morda nima "jakosti" za sintezo protiteles. Če ima bolnik hudo odpoved jeter, jetra ne morejo sintetizirati beljakovin - gradbeni material za protitelesa. V tem primeru se rezultat imenuje seronegativen, potrditev okužbe pa že zahteva neposredna in najnaprednejša metoda preiskave - PCR ali verižna reakcija s polimerazo. V nasprotju z encimskim imunskim testom ta metoda ne razkriva telesnega odziva na infekcijski proces (ki je lahko napačen ali pa ga sploh ni), PCR določimo neposredno z dednim materialom ali pa se nahaja patogen sam.
Metoda encimskega imunskega testa lahko povzroči napako v ozadju mnogih kroničnih bolezni, v ozadju imunosupresivnega zdravljenja. V helmintologiji in parazitologiji obstaja zakon: le odkrivanje parazita ali njegovih jajc je povsem zanesljiv način postavitve diagnoze. ELISA lahko proizvaja navzkrižno in lažno pozitivne metode, ki se odzivajo na številne normalne dogodke v življenju bolnika.
Za zaključek je treba povedati, da je metoda encimske imunske metode močna, vendar pomožna metoda laboratorijske diagnostike mnogih bolezni. V vsakem primeru pa je treba diagnozo postaviti na podlagi številnih dejavnikov: pritožb in anamneze bolnika, inšpekcijskih podatkov, drugih pomožnih in instrumentalnih diagnostičnih metod.
Kaj je ta ELISA?
Občasno zdravniki predpisujejo teste ELISA, da tega ne vedo vsi. Transkript ELISA ima naslednji encimski imunski test. Takšen krvni test pomaga razumeti, kako se telo bori proti boleznim infekcijskega spektra in dokazuje fazo bolezni. Enzimski imunski test pomaga pri oceni zaščitne aktivnosti krvi, odkrivanju imunske pomanjkljivosti pri boleznih, povezanih z okužbami, hormonskimi težavami itd.
Kaj je bistvo
Preizkus krvi ELISA deluje z materialom, ki se zbira iz vene. Poleg tega je za pregled na voljo vsebina steklastega telesa, tekočina iz hrbtenjače, madeži iz sečnice ali cervikalnega kanala. Za ELISA analizo ELISA pri nosečnicah lahko vzamemo tekočino, ki jo obdaja plod.
Analizo lahko opravite šele po predhodnem postu. 14 dni pred dostavo seruma je pomembno zavrniti vsako zdravljenje, ki ima posebno vrednost. Govorimo o jemanju drog v naslednjih spektrih:
- antibiotik;
- protivirusen;
- antiparazitik.
Istočasno lahko kri testiramo neposredno na ELISA z uporabo različnih tehnik. Obstaja neposreden, posreden način, konkurenca in blokiranje. Ko je organizem okužen s patogenim povzročiteljem, imenovanim antigen, začne imunost povzročiti specifična protitelesa, na primer za hepatitis. Ta protitelesa so zasnovana tako, da se "ukvarjajo" s tujimi agenti. Kaj so protitelesa? To so posebni proteini, ki se lahko vežejo na antigene in tvorijo imunološke komplekse, ki se imenujejo antigen-protitelo. Za odkrivanje teh kompleksov je odgovorna diagnoza ELISA. Za odkrivanje antigena dodamo protitelesa protitelesnemu vzorcu krvi ali izvedemo obratni postopek.
Pozitivni rezultat ELISA temelji na reakciji imunosti in encimov. Pod delovanjem prvega se agenti okužb in celični elementi vežejo, drugi pa pomaga vizualizirati rezultat prvega. Imunski odziv vključuje vezavo protitelesa in antigena. Kot rezultat tega procesa se oblikuje kompleks imunske orientacije. Vse celice na njihovi površini imajo antigen. Imunska celica zajame sumljivo in antigen, ki je pritrjen na površino, opravi primerjalni postopek z informacijami, ki so “naložene” v spomin. Če je opis opisan, se celica vrne domov, če pa ne, pride do povezave, za katero je odgovorno protitelo, ki je pritrjeno na površino.
Encimska reakcija medtem omogoča, da se snovi preoblikujejo v nove. Na material vpliva encim. V tem primeru encimske razlike zagotavljajo različni substrati. Izdelek, ki je postal posledica te reakcije, se pošlje, da se določi količina patogena, katerega določanje temelji na gostoti barve raztopine.
Značilnosti metode
Preskus krvi ELISA je predpisan, ko morate diagnosticirati alergije, bolezni virusnega izvora. Na voljo je tudi ELISA analiza za sifilis in številne druge okužbe, katerih prenos poteka med nezaščitenim spolnim stikom. Takšna diagnostika postaja vse bolj priljubljena v primerjavi s PCR. Dejstvo je, da PCR vključuje delo z razmazom. V nasprotju s PCR se rezultati ELISA lahko dobijo s krvnimi testi.
Poleg tega se lahko predpiše krvna preiskava z uporabo ELISA, kadar je treba ugotoviti prisotnost imunske pomanjkljivosti, diagnosticirati onkologijo, oceniti, kako učinkovito je zdravljenje, določiti raven hormonov in opraviti predoperativni pregled v kompleksu.
Če primerjate študijo z ELISA, na primer PCR, lahko najdete številne prednosti. Glavna stvar je možnost popolne diagnoze celo v najzgodnejših fazah razvoja. Poleg tega rezultati ELISA pomagajo pri določanju specifične stopnje bolezni, ravni, na kateri je njen razvoj.
Analiza ELISA v primerjavi s PCR ima večjo učinkovitost, poleg tega jo lahko med nosečnostjo vzamete za odkrivanje spolno prenosljivih bolezni. Kdor je opravil to analizo, lahko ugotovi koncentracijo TSH v serumu. Zelo pomembno je, da preverite, kakšna je reakcija ščitnice, ali je v njenem delu prišlo do napak.
Dodatne prednosti, ki jih imajo, in verižna reakcija s polimerazo, so hitrost raziskav in zato hitri rezultati. Zdravniki cenijo natančnost rezultatov. Če govorimo o spolno prenosljivih boleznih, potem je raven 98 odstotkov, kot je to pri koncentraciji TSH.
Ne smemo pozabiti, da se pri razvrščanju metod psiholoških raziskav in dodeljevanju testa ELISA, ukvarja z analizo sposobnosti spremljanja dinamike razvoja okužbe. ELISA se aktivno uporablja za odkrivanje parazitov v telesu, pri žariščih okužb pa ta metoda testiranja omogoča množično testiranje, zlasti ob upoštevanju, da so stroški analize sprejemljivi.
Seveda, brez pomanjkljivosti ne more storiti. V tem primeru pa govorimo o posrednih značilnostih testa. Zlasti govorimo o tem, da je nemogoče izključiti morebitne napake pri opredelitvi standardov. Včasih lahko analiza, ki jo opravi popolnoma zdravo dekle, pokaže lažno pozitivne rezultate ali negativne v nasprotnem primeru. Vendar pa klasifikacija metod psiholoških raziskav v večini primerov povezuje takšne pomanjkljivosti z nepravilno pripravo ali kršitvijo tehnike, s katero je bil material zbran.
Funkcije delovanja
Pri analizi ELISA v večini primerov se darovalo kri. Pred doniranjem krvi je pomembno, da vzdržimo najmanj osem ur lakote, da izključimo številna zdravila, ki vplivajo na rezultat analize. Govorimo o antihistaminskih zdravilih in hormonskih zdravilih, ki vplivajo na delovanje ščitnice. Poleg tega je treba alkohol izvzeti najmanj en dan. Prepričajte se, da ne kadite vsaj eno uro pred darovanjem krvi. Izkrivljanje rezultatov je možno pri jemanju zdravil.
Preden se odločimo za dekodiranje, je vredno omeniti, katere merilne metode se uporabljajo za takšen test. Kot rezultat analize bodo prikazana protitelesa ali imunoglobulini Ig. Pod njimi so tiste zelo specifične beljakovine, o katerih smo prej razpravljali. V-limfociti so odgovorni za njihovo proizvodnjo, takoj ko virusi, bakterije ali glivice vstopijo v telo. Obstaja pet vrst imunoglobulinov, označenih z latinskim.
Njihove razlike so povezane z različno molekularno obliko in maso. Imajo različno razpolovno dobo, so vključeni na različne načine ali niso sprejeti v infekcijskih procesih. Časovne omejitve, v katerih se lahko odkrijejo od trenutka, ko se je okužba zgodila, se razlikujejo.
Če razvrstimo imunoglobuline z molekulsko maso kot osnovo, ima IgM najvišje indekse. Značilnost te vrste imunoglobulina je pomanjkanje možnosti prehoda skozi placentno pregrado. Če se pri analizi novorojenčka najde IgM, gre za prisotnost okužbe pri plodu.
Velika večina človeške krvi vsebuje imunoglobuline IgG, ki so najmanjša količina IgE. Ko govorimo o delu v okviru infekcijskih procesov, je treba posebno pozornost nameniti variantam A, M, G. IgE deluje kot marker alergijske reakcije. IgD najdemo samo v tkivih bezgavk in tonzil. To je pomembno pri ustvarjanju imunitete na lokalni ravni.
Poleg tega analiza opredeljuje antigene. Pod njimi se razumejo snovi visokega molekularnega tipa, ki so znane po organskem izvoru. Zlasti govorimo o povzročiteljih infekcijskih in drugih bolezni spektra. Poleg tega pomenijo snovi, ki signalizirajo različne celične spremembe, ki so neizogibne pri številnih boleznih. Navedeno je tudi imunski kompleks, ki dokazuje kompleks antigen-protitelo, ki je vključen v imunski proces.
Običajno je čas proizvodnje odvisen od posameznega laboratorija, na katerega ste se prijavili. Številni laboratoriji lahko zagotovijo rezultate v roku enega ali dveh dni, drugi potrebujejo teden dni. Zamude lahko nastanejo zaradi potrebe po kopičenju določene količine seruma.
Vpliv na rezultate in prepis
Kljub temu, da se ELISA šteje za eno najbolj natančnih metod preverjanja, se še vedno pojavljajo napake. Postopek odvzema materiala, njegov neustrezen transport in shranjevanje materiala lahko vplivata na pravilnost rezultatov. Kot že omenjeno, jemanje zdravil je prisotnost skritih bolezni. Presnovne motnje ali imunska pomanjkljivost prav tako ne omogočajo, da bi dobili prave kazalnike. V obdobju do enega leta tudi novorojenčki niso povsem pravilni kazalniki. To je posledica dejstva, da telo vsebuje materinska protitelesa.
Ko govorimo o dekodiranju, analizni obrazci uporabljajo pozitiven ali negativen znak, ki kaže rezultate izračuna za vsak razred imunoglobulina. Kot verjetne možnosti bodo naslednje.
Odsotnost zaznanih IgG, IgA in IgM kaže popolno okrevanje. Negativni rezultat za sestavine, kot so IgM, IgA, IgG, je pomanjkanje imunosti na okužbo.
Kombinacija pozitivnih in negativnih rezultatov za IgG, IgA v kombinaciji s pozitivnimi IgM kaže na prisotnost akutne okužbe v telesu. Pozitiven rezultat IgG v kombinaciji z negativnimi kazalci IgA in IgM ustreza obdobju po cepljenju ali pridobitvi imunosti, ki je posledica okužbe.
Kombinacija pozitivnega ali negativnega rezultata IgG, IgA in negativnega rezultata, IgM kaže na prisotnost okužbe v njenem kroničnem poteku. Pozitiven rezultat za tri sestavine: IgG, IgM, IgA kaže na poslabšanje okužbe, ki je bila v kronični obliki uhajanja. Poleg neposrednega izboljšanja razredov proti telesu zdravnik prejme informacije o svojih kvantitativnih kazalnikih kot del dekodiranja analize ELISA. Pomembno je poudariti, da je za dekodiranje odgovoren lečeči zdravnik. Dejstvo je, da ga lahko kombinacija nekaterih komponent pripelje do ideje o pridobljenem lažnem rezultatu, kar bo vodilo k ponovni predaji. Samo dekodiranje je v tem primeru neuporabno.
ELISA analiza - kaj je: metode rezultatov
Krvni test se uporablja za oceno sposobnosti telesa, da se upre nalezljivim boleznim ali za določitev faze patologije. Metoda ELISA zavzema pomembno mesto med laboratorijskimi študijami, pomaga pri celoviti študiji delovanja zaščitne funkcije krvi, ugotavljanju imunske pomanjkljivosti pri nalezljivih boleznih, krvnih motnjah, hormonskih, avtoimunskih procesih.
Kaj je encimski imunski test
Ta metoda se uporablja za laboratorijske teste, določa prisotnost zaščitnih dejavnikov narave beljakovin v krvi (protitelesa) na določene patogene dejavnike (antigene). Imunoanaliza določa krvne imunoglobuline, ki jih je mogoče odkriti v obliki imunokompleksov. Pojavljajo se, ko se pojavijo kompleksne nevrohumoralne reakcije imunske obrambe osebe, ki postanejo odziv na vnos tujih antigenov.
V vsakem tipu povzročitelja bolezni se v telesu proizvajajo specifična protitelesa. Nato pride do vezave patološkega mikroorganizma ali antigena, nastane kompleksna spojina "antigen-protitelo". Nato se nevtralizira, pride do encimske lize, reakcije fagocitoze in konča postopek odstranitve iz telesa. Prisotnost specifičnih kompleksov, določenih z ELISA, kaže na vrsto patogena, škodljivo snov pri pacientu.
Razredi imunoglobulinov
Znanstveniki so odkrili in preučili 5 vrst imunoglobulinov: IgE, IgD, IgG, IgM, IgA. Obstajajo še drugi razredi, vendar so še v fazi raziskovanja, njihova vloga pa ni bila v celoti pojasnjena. V praktični medicini so pomembni A, M, G. Informativnost, natančnost določanja temelji na časovnih intervalih, po katerih se pojavljajo, dosežejo maksimum in izginejo.
- Imunoglobulini IgA (A) - opravljajo zaščitno funkcijo sluznice sečil, prebavil, dihal. Nemogoče jih je identificirati v akutnem nastopu patologije, nastanejo le 2 tedna po prvih znakih bolezni, v nekaterih primerih celo kasneje. Globulin A je koncentriran v sluznicah (približno 80% vseh). Preostanek je v krvi za nevtralizacijo in uničenje mikroorganizmov. Do 8. tedna po zmanjšanju akutne faze patologije se število teh imunoglobulinov zmanjša do popolnega izginotja.
- Prvi in glavni označevalec akutnega obdobja razvoja bolezni so globulini IgM (M). Analiza le-teh je prikazana 5. dan po pojavu prvih znakov patologije. ELISA te imunoglobuline zaznava prvih 6 tednov, nato pa hitro izginejo.
- Razred imunoglobulinov IgG (G) kaže preostali imunski odziv v krvi na patološki proces. Analiza bo pokazala dejavnik mesec dni po začetku bolezni. Potem so še vedno dolgi meseci, leta in celo življenjska doba, določena v analizi. Ščitijo osebo pred ponovitvijo bolezni, včasih zagotovijo nemožnost sekundarnega razvoja patologije. Pri določanju rasti imunoglobulina G sumi ponovna okužba patologije. Za potrditev se opravi več testov ELISA v presledku 2 tedna.
- V parazitologiji in alergologiji se uporablja imunoglobulinski IgE (E).
- Imunoglobulinski IgD (D) je na B-limfocitih, majhna koncentracija je pri zdravih ljudeh. Po 10 letih človeškega življenja doseže maksimalne vrednosti. Pri analizi ELISA je pri imunoglobulinu D pri bolnikih s sistemskimi boleznimi vezivnega tkiva, med nosečnostjo, z bronhialno astmo, boleznimi, ki jih povzroča stanje imunske pomanjkljivosti, opažena rast imunoglobulina D. t
Indikacije za krvne preiskave z ELISA testom
Z uporabo te analize lahko ocenite učinkovitost zdravljenja, izvedete celovito študijo pred operacijami presaditve, ugotovite stanje imunske pomanjkljivosti in protitelesa na več kot 600 vrst alergenov. ELISA uporablja krvni test kot dodatno metodo za odkrivanje rakavih celic. Če je potrebno, določite analizo za odkrivanje protiteles proti mikrobom, ki izzovejo spolno patologijo:
- trihomonijaza;
- sifilis;
- toksoplazmoza;
- mikoplazmoza;
- ureaplazmoza
Pri vnetjih helmintov bomo v testu ELISA opazili povečanje števila imunoglobulinov. Izvajajo se študije, ki potrjujejo, da ima bolnik:
- Virus Epstein-Barr;
- okužbe s herpesom;
- citomegalovirus;
- virusnih hepatitisov.
V parazitologiji
ELISA se uporablja pri diagnozi parazitskih bolezni, specifični imunoglobulinski IgE postane indikator. Njena rast v krvi se zabeleži, ko je pacientovo telo okuženo s paraziti. Imunoglobulin E postane označevalec atopične reakcije pri alergijskih procesih. Vsebina v krvi - nepomembna. Lokalizira se praviloma na sluznicah, makrofagih, bazofilcih.
Glavna funkcija proteinskega kompleksa je zaščita sluznice telesa. Sodeluje tudi pri imunskih reakcijah, ki so namenjene uničenju parazitov. Odgovoren je za aktivacijo IgE makrofagov in eozinofilcev. V primerjavi z analiznimi podatki to dejstvo pomaga vzpostaviti diagnozo. ELISA se uporablja za odkrivanje:
- kronična akutna opisthorchaasis;
- okrogli črvi: pinworms, ascaris;
- Giardia;
- trihinoza;
- amebiasis;
- oblike leishmanioze;
- vsebnost toksoplazme.
Krvni test z ELISA testom
Preskus krvi ELISA ni edina možnost za določanje imunoglobulinov. Včasih se za to študijo zbira spinalna tekočina, steklasto tkivo, amnijska tekočina. Pri uporabi krvi se z injekcijsko iglo odvzame iz kubitalne vene. Potrebno je opraviti analizo na prazen želodec, pred ELISA testom ni priporočljivo jemati zdravil, ki lahko vplivajo na rezultat. Pred dajanjem biomateriala je treba zavreči alkohol, kajenje in uporabo narkotičnih snovi. Različice rezultatov preskusa:
- Z negativnim imunoglobulinom IgG, IgM, IgA, zdravniki pravijo, da ni patologije ali začetne faze. Enak rezultat (negativen) bo po popolnem okrevanju po dolgem obdobju.
- Če je IgG pozitiven in IgM in IgA nista zaznana, to kaže na nastanek imunosti po cepljenju ali infekcijski bolezni.
- Pri visokih IgM in negativnih IgA titrih se IgG diagnosticira kot akutna nalezljiva bolezen.
- Z pozitivnim indikatorjem IgG, IgM, IgA, zdravniki govorijo o akutni fazi ponovitve že obstoječe kronične bolezni.
- Pri kroničnih okužbah, ki so v fazi pogrezanja (remisije), ELISA analiza kaže negativne titre IgM, IgA in IgG pa bosta pozitivna.
Prednosti in slabosti ELISA analize
Glavna negativna točka te študije je verjetnost lažno pozitivnih ali lažno negativnih rezultatov. Razlog za nezanesljivost je jemanje zdravil, tehnične pomanjkljivosti laboratorija. Falsificirati analizo lahko proces presnovne motnje v telesu. Glavne prednosti ELISA so:
- natančnost, diagnostična specifičnost;
- analiza nizkih stroškov;
- hitrost pridobivanja rezultatov;
- možnost dinamičnega nadzora stopnje patologije, učinkovitosti zdravljenja;
- enostavnost raziskav;
- sposobnost izvajanja množičnih raziskav žarišč okužbe;
- neboleč, varnost za bolnika;
- pri obdelavi informacijske tehnologije.
Kaj je krvni test ELISA in zakaj je pomemben za diagnozo
ELISA test krvi, kaj je to? Verjetno vsi se spomnijo, da v odgovor na prodor virusov v boj proti njim, telo začne proizvajati komplekse protiteles. Te imunološke spojine imajo sposobnost prepoznati in uničiti "svojega" patogena. Na to in zgradili študijo, ki vam omogoča, da določite prisotnost in količino imunofermentov, značilnih za določeno bolezen.
Nekaj splošnih informacij o analizi
ELISA ali ELISA omogoča določanje specifičnih protiteles (imunoglobulinov) za določeno vrsto patogena. Metoda ELISA temelji na naslednjem: t
- kot odgovor na uvedbo mikroorganizma začne imunski sistem proizvajati protitelesa;
- imunokompleksi so specifični in uničujejo le tuje celice;
- kadar se patogeni dodajo serumu pacientovega ekstrakta, če obstajajo protitelesa, se tvori standardna spojina: protitelesni antigen in aktivno sproščanje encimov.
Pozitivno ali negativno testiranje v laboratoriju se oceni glede na to, ali se je reakcija pojavila v plazmi po dodajanju patogena in kako intenziven je bil ta proces.
Norma za zdravo osebo je enkratna imunokompleksa ali njihova odsotnost.
Analiza ELISA ne kaže nobene posebne bolezni, temveč omogoča le domnevati približno vrsto patogena, ki je povzročil nastanek imunskih kompleksov in določiti stopnjo vnetnega procesa. To vam omogoča nastavitev nadaljnjih diagnostičnih metod.
O imunoglobulinih
Kar je imunoglobulin, je za mnoge jasno: imunski kompleks, ki se oblikuje kot odziv na vstop tujih celic. Toda kaj so?
Metoda ELISA vam omogoča izbiro 5 vrst imunoglobulinov:
A, M in G so bistvenega pomena za diagnostiko (nekateri viri navajajo samo te tri imunske komplekse za diagnostiko), zato je vredno razmisliti o njihovih značilnostih:
- A - odgovoren za zaščito sluznic. Pri akutnih boleznih se pojavi v krvi 14 dni po okužbi, včasih tudi kasneje, in izgine po 8 tednih od nastopa simptomov bolezni. Če imunokompleksni IgA traja dlje, lahko predpostavimo, da je bolezen prešla v kronično obliko. Antivirus A kaže na poškodbo sluznice mehurja, črevesja ali dihal.
- M - služi kot indikator akutne faze bolezni. Opazen je v plazmi po 5 dneh od okužbe (tudi če ni izrazitih znakov bolezni) in izgine po 6 tednih, če pride do razrešitve akutnega procesa.
- G - rezidualna reakcija in imunokompleksi trajajo dolgo časa (včasih celo življenje) in preprečujejo ponovno okužbo ali pojav recidiva. Načelo cepljenja temelji na tvorbi protiteles G, ko se pri ljudeh po uvedbi oslabljenih mikrobov in virusov razvije dolgotrajna imunost. Povečan G je indikator, da je patogen ponovno vstopil v telo ali poslabšal kronično okužbo.
Preizkus krvi ELISA za E in D ni vključen v obvezni program preverjanja. Imenovan je v naslednjih primerih:
- E - če se domneva, da patologijo povzročajo paraziti;
- D - če obstaja verjetnost, da je patologija sistemske narave ali se je pojavila zaradi nastale imunske pomanjkljivosti.
Preizkus krvi ELISA omogoča odkrivanje specifičnih protiteles proti tujim agentom že v zgodnjih fazah patologije. Test temelji na standardni reakciji antigen-protiteles, ki omogoča ugotavljanje prisotnosti protiteles proti povzročitelju.
Indikacije za laboratorijsko diagnozo
Za preiskave krvi je prikazan encimsko vezan imunski test, če obstaja sum na naslednje patologije:
- onkologija;
- virusni hepatitis (za vse vrste virusov);
- herpetične lezije sluznice ali kože;
- nekatere infekcijske procese (salmoneloza, ošpice, encefalitis, dizenterija);
sifilis; - spolno prenosljive okužbe (gonoreja, klamidija, mikoplazmoza itd.);
- atopični procesi (alergije);
- citomegalovirus;
- endokrine motnje;
- imunske pomanjkljivosti;
- neplodnost;
- helmintske invazije.
Tudi krvni test ELISA vam omogoča napovedovanje poteka nekaterih nenalezljivih bolezni:
- srčni napad;
- kap;
- nevrološke motnje;
- bolezni ledvic.
Tudi z preventivnim namenom preživite IFA med zdravniškimi pregledi.
Diagnostika ELISA lahko odkrije več kot 600 protiteles proti infekcijskim in neinfekcijskim antigenom, zaradi česar je študija nujna za odkrivanje bolezni v zgodnji fazi. ELISA se šteje za najbolj informativen pri testiranju na HIV in onkologijo.
Kaj je osnova tehnike
Zdi se, da obstaja le pet imunoglobulinov in z njihovo pomočjo se določi veliko število patoloških procesov. Ali je mogoče?
Je možno. To je zato, ker se štetje imunoglobulinskih spojin izvede po različnih testih:
- antinuklearni organi (označite avtoimunske procese);
- revmatoidni faktor (razkriva revmatske spremembe);
- dvoverižna DNA (ugotovljena skupina beljakovin, ki se pojavljajo pri sistemskih boleznih);
- ENA zaslon (opredeljuje več vrst antigenov, značilnih za revmatski faktor ali sistemske lezije vezivnega tkiva);
- protikardiolipinska protitelesa (imunokompleksi nastajajo med HIV, epilepsijo in nekaterimi sistemskimi procesi);
- ANGA zaslon (spojine, značilne za avtoimunske procese);
- citrulinski peptid (protitelesa se pojavijo pri revmatoidnem artritisu);
- C-reaktivni protein (C-reaktivni protein kaže prisotnost akutnega ali poslabšanja kroničnega procesa);
- imunofluorescenčno analizo (kaže na hormonsko odpoved ali prisotnost malignih tumorjev).
Analiza dekodiranja se izvede ob upoštevanju uporabljenih metod. Vrednotenje pridobljenih podatkov je precej zapleteno in ga izvaja zdravnik, za bolnike, ki želijo neodvisno analizirati podatke, pridobljene iz laboratorija pred obiskom zdravnika, pa je na voljo naslednja tabela:
Tabela prikazuje samo splošne informacije. Analiza ELISA pri dešifriranju, ki jo opravi zdravnik, upošteva ne le prisotnost imunsko-encimskih spojin, temveč tudi njihovo število, pa tudi metode, uporabljene za izvedbo študije.
Prednosti metode
Analizator ELISA se pogosto uporablja pri diferencialni diagnozi bolezni in za spremljanje kakovosti zdravljenja. Tehnika ima več prednosti:
- Poceni Diagnostični kompleti so relativno poceni.
- Preprostost Ni potrebe, da se opremi s prefinjeno opremo in da se raziskave lahko izvajajo v katerem koli laboratoriju.
- Zelo informativen. Zanesljivost določanja vrste antigena je približno 90%.
- Hitrost. Analizator ELISA je avtomatiziran, v laboratoriju za nujne primere pa je mogoče te študije pridobiti v nekaj urah po predložitvi biomateriala.
- Zgodnja diagnoza. Imunoglobulini se pojavijo v krvi v začetni fazi bolezni.
- Trajanje skladiščenja. Material, ki ga odvzame bolnik, se lahko shrani do enega leta.
- Faza bolezni. Razmerje in glavne značilnosti imunoglobulinov, ki jih najdemo v plazmi, omogočajo določitev resnosti poteka in stopnje bolezni.
- Nadzor dinamike. Med zdravljenjem z ELISA testom ELISA omogoča korekcijo terapije, ki jo je treba izvesti glede na laboratorijske parametre.
- Enostavnost vzorčenja biomateriala. Za diagnozo zadostuje majhna količina venske krvi.
Krvni test ELISA je zelo informativen in omogoča identifikacijo patologije na začetni stopnji razvoja, vendar le na podlagi laboratorijskih raziskav. Končna diagnoza je možna šele po popolnem pregledu bolnika.
Slabosti tehnike
Kljub številnim prednostim ima imunofermentacija krvnih testov nekatere pomanjkljivosti:
- nezmožnost določitve vrste patogena s 100-odstotno natančnostjo (pri nekaterih boleznih nastajajo podobni imunoglobulini);
- verjetnost pridobitve lažno pozitivnega rezultata (to se zgodi pri nosečnicah ali če se ne upoštevajo pravila za pripravo analize).
Na natančnost diagnoze lahko vpliva naslednje:
- kajenje in pitje;
- živčni napor ali stres;
- telesna dejavnost;
- jemanje določenih zdravil (kri je mogoče darovati le 10 dni po prekinitvi zdravljenja).
Te pomanjkljivosti krvnega testa za test ELISA zdravnikom ne preprečujejo, da bi metodo prepoznali kot najbolj primerno in informativno metodo za odkrivanje bolezni v zgodnjih fazah. Če je potrebno, da bi se pojasnili podatki, pridobljeni iz laboratorija, se lahko bolnikom dodelijo bolj specifični testi, ki jim omogočajo, da natančneje določijo vrsto patogena.
ELISA pri parazitologiji
IgE je značilen za vpade helmintov, lahko pa se pojavi v plazmi in v primeru nekaterih alergij (v krvi se nahaja v majhni količini). Kljub verjetnosti lažno pozitivnih reakcij, parazitologi pogosto predpisujejo kri za ELISA, da bi odkrili naslednje vrste parazitov:
- helminti;
- Toksoplazma;
- amoeba;
- trihinele;
- Giardia;
- najpreprostejši;
- ravno črvi.
Vdori črvov, kot tudi nalezljivi patogeni, povzročajo nastanek protiteles E. Rast tega krvnega markerja skoraj vedno kaže na prisotnost parazitov v telesu (z atopičnimi reakcijami ostane na isti ravni ali se rahlo dvigne).
Paraziti niso nujno locirani na črevesni sluznici, lahko prodrejo v tkiva ledvic, srca in drugih organov. Če se parazitizem v črevesju zlahka zazna s prisotnostjo v testnih blatu jajc, ličink ali odraslih, se poškodba drugih tkiv določi le z encimskim imunskim testom.
Zdaj je veliko postalo jasno, kaj je ELISA in ne zastrašuje več skrivnostnega laboratorijskega zmanjšanja. Študija je imenovana ne le za potrditev bolezni. Nekateri encimski imunski testi (sifilis, HIV) so del programa obveznega zdravniškega pregleda, negativni rezultat pa je kazalnik zdravja. In če se izkaže, da je testiranje pozitivno, potem to ni razlog za paniko: čim prej se začne zdravljenje zaznane bolezni, tem bolj ugodna je napoved.